দক্ষিণ, উত্তর ও পশ্চিম ব্লটিং মধ্যে পার্থক্য | দক্ষিণ বনাম উত্তর বনাম ওয়েস্টিন ব্লটিং

Anonim

কী পার্থক্য - উত্তর বনাম দক্ষিণাংশ পশ্চিমা ব্লেটিং

ডিএনএ, আরএনএ, এবং প্রোটিন নির্দিষ্ট অনুক্রম সনাক্তকরণ বিভিন্ন জন্য আবশ্যক আণবিক জীববিজ্ঞান মধ্যে গবেষণা ধরনের। জেল ইলেক্ট্রোফোরিসিস একটি টেকনিক যা ডিএনএ, আরএনএ, এবং প্রোটিনকে তাদের আকার অনুযায়ী পৃথক করে। জেল প্রোফাইল থেকে, বিশেষ ডিএনএ সিকোয়েন্স, আরএনএ সিকোয়েন্স, বা প্রোটিন লেবেলযুক্ত প্রোবের সাথে ব্লটিং এবং হাইব্রিডাইজেশন নামে বিশেষ কৌশল দ্বারা সনাক্ত করা হয়। তিনটি ভিন্ন ধরনের ধ্বনিত পদ্ধতি যেমন দক্ষিণ, উত্তর ও পশ্চিম। উত্তরের দক্ষিণ ও পশ্চিমা ব্লোটিংয়ের মূল পার্থক্যটি একটি নমুনা থেকে সনাক্ত করে অণুর ধরনটির সাথে থাকে। দক্ষিণ ব্লটিং একটি পদ্ধতি যা একটি ডিএনএ নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ ক্রম সনাক্ত করে। উত্তর ব্লটিং একটি কৌশল যা একটি RNA নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট RNA ক্রম সনাক্ত করে। পশ্চিমী ব্লটিং একটি পদ্ধতি যা একটি প্রোটিন নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট প্রোটিন সনাক্ত করে।

সুচিপত্র

1। সংক্ষিপ্ত বিবরণ এবং কী পার্থক্য

2 দক্ষিণ ব্লটিং কি

3 উত্তর শোষণ কি

4 ওয়েস্টার্ন ব্লটিং কি

5 পার্শ্ব তুলনা দ্বারা সাইড - উত্তর বনাম দক্ষিণ পশ্চিম পশ্চিম ব্লটিং

6 সংক্ষিপ্ত বিবরণ

দক্ষিণ ব্লটিং কি?

ডিএনএ নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ অনুক্রমের সনাক্তকরণের জন্য 1975 সালে ই। এম। সাউথার দ্বারা সাউদার্ন ব্লটিং টেকনিক তৈরি করা হয়েছিল। এই আণবিক জীববিদ্যা প্রথম ব্লটিং কৌশল চালু। এটি ডিএনএ থেকে নির্দিষ্ট জিনগুলির সনাক্তকরণ সক্ষম করে, ডিএনএ থেকে নির্দিষ্ট টুকরা ইত্যাদি। দক্ষিণ ব্লটিং টেকনিকের সাথে জড়িত বিভিন্ন পদক্ষেপ রয়েছে। তারা যেমন নিম্নরূপ।

  1. ডিএনএ নমুনা থেকে বিচ্ছিন্ন এবং সীমাবদ্ধতা endonucleases সঙ্গে হজম।
  2. আঁকা নমুনা Agarose জেল ইলেক্ট্রোফোরিয়সিস দ্বারা পৃথক করা হয়।
  3. জেলের ডিএনএ টুকরা একটি ক্ষারযুক্ত সমাধান ব্যবহার করে একক strands মধ্যে ডাইনাপার্ট হয়।
  4. কৈশিক স্থানান্তর দ্বারা একক ফাঁকা ডিএনএ একটি নাইট্রোকেলুলোস ফিল্টার ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়।
  5. স্থায়ীভাবে ঝিল্লি সম্মুখের পরিবর্তিত ডিএনএ সংশোধন করা হয়।
  6. ঝিল্লায় স্থির ডিএনএ লেবেলযুক্ত প্রোবের সাথে হাইব্রিড করা হয়।
  7. ধাবমান দ্বারা ঝিল্লি থেকে অবাঞ্ছিত ডিএনএ ধুয়ে ফেলা হয়।
  8. এক্স-রে ফিল্মটি ঝিল্লিকে উন্মুক্ত এবং একটি অটোরড্রাইওগ্রাফ প্রস্তুত করা হয়।

আণবিক জীববিজ্ঞানের বিভিন্ন দিকের জন্য দক্ষিণাংশের ছাপানো প্রয়োগ করা হয়।এটি আরএফএলপি ম্যাপিং, ফরেনসিক স্টাডিজ, জিন এক্সপ্রেশনে ডিএনএ মেথিলেশন, জেনেটিক ডিসঅর্ডারগুলির পরিবর্তিত জিনের সনাক্তকরণ, ডিএনএ ফিঙ্গারপ্রিন্টিং ইত্যাদির জন্য দরকারী। চিত্র 01: সাউদার্ন ব্লটিং টেকনিক

উত্তর ব্লটিং কি?

উত্তর বিস্ফোরণ হল একটি পদ্ধতি যা একটি নির্দিষ্ট RNA ক্রম বা mRNA ক্রম সনাক্ত করতে পরিকল্পিত একটি নমুনা থেকে জিন এক্সপ্রেশন অধ্যয়ন। এই কৌশল এলওয়াইন, কাম্প, এবং স্টার্ক দ্বারা 1979 সালে বিকশিত হয়েছিল। এটি বিভিন্ন পদক্ষেপের কারণে sourthern এবং পশ্চিমা ব্লটিং কৌশল থেকে পৃথক। যাইহোক, এই টেকনিক এছাড়াও জেল ইলেক্ট্রোফোরিসিস মাধ্যমে সঞ্চালিত হয়, blotting, এবং নির্দিষ্ট লেবেল অনুসন্ধান এবং সনাক্তকরণ সঙ্গে hybridization। উত্তর গোড়ালি কৌশলটি নিম্নরূপ সঞ্চালিত হয়।

নমুনা থেকে আরএনএ বের করা হয় এবং জেল ইলেক্ট্রোফোরিয়সিস দ্বারা পৃথক করা হয়।

  1. আরএনএটি একটি জঞ্জাল ঝিল্লিতে জেল থেকে স্থানান্তরিত এবং স্থির করা হয়।
  2. ঝিল্লিটি সিডিএনএ বা আরএনএ (প্রোবটি নমুনা একটি নির্দিষ্ট অনুক্রমের পরিপূরক) থেকে প্রস্তুত করা একটি লেবেলযুক্ত অনুসন্ধানের সাথে চিকিত্সা করা হয়।
  3. একটি নির্দিষ্ট অনুক্রমের সাথে বাঁধার জন্য ঝিল্লির সাথে প্রোবের পরিমাপ করা হয়।
  4. অবাঞ্ছিত অনুসন্ধানগুলি ধুয়ে ফেলা হয়েছে।
  5. হাইব্রীডাইজড টুকরা একটি অটোরড্রোডিগ্রাফ দ্বারা সনাক্ত করা হয়।
  6. উত্তর ব্লটিং হচ্ছে হাইব্রিডেড এমআরএনএ সনাক্তকরণ এবং পরিমাপের একটি গুরুত্বপূর্ণ হাতিয়ার, আরএনএ ডিগ্রিডেশন অধ্যয়নরত, আরএনএ অর্ধ-জীবন মূল্যায়ন, আরএনএ স্প্লাইনিং সনাক্তকরণ, জিন এক্সপ্রেশন ইত্যাদি অধ্যয়ন করা ইত্যাদি। 999 চিত্র 02: উত্তর ব্লটিং

ওয়েস্টার্ন ব্লটিং কি?

পশ্চিমী ব্লটটিং হল একটি প্রোটিন মিশ্রণ থেকে নির্দিষ্ট প্রোটিনকে লেবেলযুক্ত অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে সনাক্ত করার একটি পদ্ধতি। অতএব, পশ্চিমা দোষকে

ইমিউনব্লট

নামেও পরিচিত। এই কৌশল টাওয়ারিন এট আর দ্বারা 1979 সালে চালু করা হয়েছিল এবং এটি এখন নিয়মিত প্রোটিন বিশ্লেষণের জন্য ল্যাবসে সঞ্চালিত হয়। ধাপ নীচে অনুসরণ করা হয়। নমুনা থেকে প্রোটিনগুলি বের করা হয় প্রোটিনগুলি polyacrylamide gel ইলেক্ট্রোফোরিসিসের মাধ্যমে তাদের আকার দ্বারা পৃথক করা হয়

  1. বিচ্ছিন্ন অণুগুলিকে পিপিডিএফ ঝিল্লায় স্থানান্তরিত করা হয় বা ইলেক্ট্রোপ্যারেশন দ্বারা nitrocellulose ঝিল্লি
  2. ঝিল্লি অনিয়ন্ত্রিত বন্ধনের জন্য বন্ধ করা হয় অ্যান্টিবডিগুলি
  3. ট্রান্সফার প্রোটিন প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (এনজাইম লেবেলযুক্ত অ্যান্টিবডি) দিয়ে আবদ্ধ।
  4. ঝিল্লিটি অনির্দিষ্টভাবে আবদ্ধ প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি সরিয়ে ফেলার জন্য ধুয়েছে
  5. বেষ্টন অ্যান্টিবডিগুলি একটি স্তর যোগ করে এবং গঠিত রঙিন ঘূর্ণন সনাক্ত করে সনাক্ত করা হয়
  6. ওয়েস্টার্ন ব্লটিং অ্যান্টি এইচআইভি অ্যান্টিবডি সনাক্ত করতে একটি মানুষের সিরাম নমুনা । পাশ্চাত্য ব্লটকে হেপাটাইটিস বি সংক্রমণের জন্য একটি নিশ্চিতিক পরীক্ষা হিসেবে এবং পাউন্ড গরু রোগের জন্য নির্দিষ্ট পরীক্ষা হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে।
  7. চিত্র 03: পশ্চিমা ব্লটিং

উত্তর সাউদার্ন ও পশ্চিম ব্লটিংয়ের মধ্যে পার্থক্য কি?

- টেবিল থেকে মধ্যবর্তী বিন্যাসের অনুচ্ছেদ মধ্যবিত্ত ->

উত্তর বনাম দক্ষিণাঞ্চল পশ্চিম পশ্চিম ব্লটিং

অণুর ধরন সনাক্ত হয়েছে

উত্তর ব্লটিং

উত্তর ব্লটিং একটি আরএনএন নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট আরএনএ ক্রম সনাক্ত করে।
দক্ষিণ ব্লটিং দক্ষিণ ব্লটিং একটি ডিএনএ নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ ক্রম সনাক্ত।
পশ্চিমীয় ব্লটিং পশ্চিমী ব্লটটিং একটি প্রোটিন নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট প্রোটিন সনাক্ত করে।
জেলের ধরন উত্তর ব্লটিং
এগারোজ / ফরমালডিহাইড জেল ব্যবহার করে।
দক্ষিণ ব্লটিং এটি একটি অ্যাগারোস জেল ব্যবহার করে।
পশ্চিমীয় ব্লটিং এইটি পলিিয়াক্রেলাইড জেল ব্যবহার করে।
ব্লটিং পদ্ধতি উত্তর ব্লটিং
এটি একটি কৈশিক স্থানান্তর।
দক্ষিণ ব্লটিং এটি একটি কৈশিক স্থানান্তর।
পশ্চিমা ব্লটিং এটি একটি বৈদ্যুতিক স্থানান্তর।
ব্যবহার করা প্রোবের উত্তর ব্লটিং
সিডিএনএ বা আরএনএ প্রোবগুলির নাম দেওয়া হয়েছে রেডিওactively বা অ-ইউনিকোয়েট।
দক্ষিণ ব্লটিং ডিএনএ অনুসন্ধানগুলি তেজস্ক্রিয়া বা অ-রেডিও-র্যাক্টিভভাবে লেবেলযুক্ত।
পশ্চিমী ব্লটিং প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি প্রোব হিসাবে ব্যবহার করা হয়।
ডিটেকশন সিস্টেম উত্তর ব্লটিং
এটি একটি অটোরড্রোডিগ্রাফ, অথবা হালকা বা রঙ পরিবর্তন সনাক্তকরণের মাধ্যমে করা হয়।
দক্ষিণ ব্লটিং এটি একটি অটোরড্রোগ্রাফিক ব্যবহার করে, হালকা বা রঙ পরিবর্তনের সনাক্তকরণ।
পশ্চিমীয় ব্লটিং হালকা বা রঙ পরিবর্তন সনাক্তকরণের মাধ্যমে এটি করা হয়।
সংক্ষিপ্ত বিবরণ - উত্তর বনাম দক্ষিণ পশ্চিম পশ্চিম ব্লটিং নকলের থেকে নির্দিষ্ট ডিএনএ, আরএনএ বা প্রোটিন সনাক্তকরণের জন্য ব্লেটিং একটি বিশেষ কৌশল। একটি নির্দিষ্ট ধরনের অণুর সনাক্তকরণের জন্য তিনটি আলাদা আলমারি প্রক্রিয়া, যেমন উত্তর, দক্ষিণ ও পশ্চিমাঞ্চল, রয়েছে। উত্তর বিস্ফোরণ কৌশল RNA এর মিশ্রণ থেকে একটি নির্দিষ্ট RNA ক্রম সনাক্ত করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। দক্ষিণ ব্লটিং টেকনিক একটি ডিএনএ নমুনা থেকে একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ ক্রম সনাক্তকরণ সক্ষম করে এবং পশ্চিমা ছদ্মবেশ কৌশল একটি প্রোটিন মিশ্রণ থেকে একটি নির্দিষ্ট প্রোটিন সনাক্ত করতে উন্নত করা হয়।

তথ্যসূত্র

1। গিবনস, জনয় "পশ্চিমী ব্লট: প্রোটিন স্থানান্তর সংক্ষিপ্ত বিবরণ। "মেডিকেল বিজ্ঞান উত্তর আমেরিকান জার্নাল। মেদকোয়ন পাবলিকেশনস অ্যান্ড মিডিয়া প্রাইভেট লিমিটেড, মার্চ ২014। ওয়েব ২7 মার্চ ২017

২ ব্রাউন, টি। "দক্ষিণ ব্লটিং "ইমিউনোলজি বর্তমান প্রোটোকল ইউ এস এস জাতীয় গ্রন্থাগার, মে ২001। ওয়েব ২7 মার্চ ২017

3 তিনি, শান এল। "উত্তর দালাল "এনজোমোলজি পদ্ধতিতে পদ্ধতি ইউ.এস. জাতীয় লাইব্রেরী মেডিসিন, ২013। ওয়েব 27 মার্চ ২017

চিত্র সৌজন্যে:

1 "নর্দান ব্লট স্কিম" আরএনএ 405-এর মাধ্যমে - নিজস্ব কাজ (পাবলিক ডোমেইন) কমন্সে উইকিমিডিয়া

২। "ওয়েস্টার্ন ব্লট 114 এ" আমানতবাগডন - নিজস্ব কাজ (পাবলিক ডোমেইন) ওয়ার্ডপ্রেস এর মাধ্যমে উইকিমিডিয়া