পিসিআর এবং রিয়েল-টাইম পিসিআর মধ্যে পার্থক্য

PCR বনাম রিয়েল টাইম পিসিআর

পিসিআর বা পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া হল আধুনিক আণবিক জীববিজ্ঞানে বিপ্লবী আবিষ্কার, যা প্রথমটি রসায়নবিদ কার মুলিস 1983 সালে। এটি বিশ্লেষণের জন্য একটি জটিল ডিএনএতে একটি একক ক্রম প্রকাশ করা যায়। পিসিআরের মৌলিক ধারণাটি হল দুটি প্রাইমারে, যা ডিএনএ ক্রমের বিপরীত ক্রমগুলির পরিপূরক, একে অপরের দিকে নিবদ্ধ; প্রাইমারি পরিপূরক strands উত্পাদন, প্রতিটি অন্য প্রাইমার ধারণকারী ধারণকারী। অতএব, ফলাফলটি দুটি প্রাইমারের মধ্যে থাকা ডিএনএ'র সাথে সংশ্লিষ্ট একটি ক্রমের একটি বড় পরিমাণ। ডিএনএ পলিমেরেজ এনজাইমটি পিসিআরতে প্রাইমারের প্রসারিত করার জন্য ব্যবহৃত হয়। ডিএনএ পলিমারেজ একটি থার্মোস্টেবল এনজাইম, এবং এটি টেমপ্লেট ডিএনএ নির্বীজন জন্য ব্যবহৃত উচ্চ তাপমাত্রা (94 থেকে 95 ডিগ্রী সি) বেঁচে থাকার ক্ষমতা আছে।

পিসিআর তিনটি ধাপ জড়িত, যথা, বিকৃতির পুনরাবৃত্তি ঘটা, প্রাইমারের এনিনিলিং এবং ডিএনএ সংশ্লেষণ। একটি thermocycler মেশিন এই প্রতিক্রিয়া সম্পাদন করতে ব্যবহৃত হয় যাতে এটি দ্রুত এবং সঠিক তাপমাত্রা পরিবর্তন প্রোগ্রাম হতে পারে। পিসিআর এর প্রয়োগগুলি ফৌজদারি তদন্ত, ডিএনএ ফিঙ্গারপ্রিন্ট, জীবাণু সনাক্তকরণ, এবং প্রাথমিক মানব প্রজাতির ডিএনএ বিশ্লেষণ।

প্রচলিত পিসিআর কি?

--২ ->

প্রচলিত PCR- এর তিনটি প্রধান পর্যায়ে রয়েছে; ডিএনএ প্রসারমান স্তর, পিসিআর বিচ্ছেদ এবং পণ্য সনাক্তকরণ। ডিএনএ অংশ বিভাজক সাধারণত agarose জেল ইলেক্ট্রোফোরিয়সিস দ্বারা হয়। পণ্য তারপর etheiduim bromide সঙ্গে দাগ করা হয়। অবশেষে, UV আলো অধীন gels উপর ব্যান্ড কল্পনা দ্বারা সনাক্ত করা হয়। অতএব, প্রচলিত পিসিআরের চূড়ান্ত ফলাফল সংখ্যা হিসাবে প্রকাশ করা হয় না। সাধারণত প্রচলিত PCR শুধুমাত্র একটি প্যারামিটার সনাক্ত করতে সক্ষম।

রিয়েল টাইম পিসিআর কি?

পণ্যের সংশ্লেষিত হিসাবে, রিয়েল-টাইম পিসিআর পণ্যের প্রশস্ততা সনাক্ত করতে পারে। প্রযুক্তির বিকাশের ফলে, পিসিআর একটি বিশেষ কৌশল হয়ে উঠেছে, বিশেষ করে খাদ্যগুলিতে ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণ এবং শনাক্তকরণের জন্য। রিয়েল-টাইম PCR ফ্লোরসেন্ট ছোপানো সিস্টেম এবং ফ্লোরসেন্ট-ডিটেকশন ক্ষমতা দিয়ে সজ্জিত থার্মোসিলেলার ব্যবহার করে।

প্রচলিত পিসিআর এবং রিয়েল-টাইম PCR এর মধ্যে পার্থক্য কি?

• প্রচলিত পিসিআর বেশি সময় ব্যয় করছে কারণ এটি জেল ইলেক্ট্রোফোরিসিস ব্যবহার করে প্রসারিত PCR পণ্যগুলি বিশ্লেষণ করে। বিপরীতে, রিয়েল-টাইম PCR কম সময় ব্যয় করছে কারণ এটি প্রতিক্রিয়া এর প্রথম পর্যায়গুলির সময় প্রসারিত সনাক্ত করতে পারে।

• রিয়েল-টাইম পিসিআর পিসির এক্সপোনেনশিয়াল প্রজেক্ট ফেজে তথ্য সংগ্রহ করে যখন ঐতিহ্যগত পিসিআর প্রতিক্রিয়া শেষে-এ ডাটা সংগ্রহ করে।

• প্রচলিত PCR এর শেষ বিন্দু ফলাফল খুব সুনির্দিষ্ট নাও হতে পারে, তবে রিয়েল-টাইম PCR এর ফলাফল খুব সুনির্দিষ্ট।

• রিয়েল-টাইম পিসিআর প্রচলিত পিসিআর থেকে বেশি সংবেদনশীল।

• প্রচলিত পিসিআরটির খুব কম রেজল্যুশন থাকলে উচ্চ-রেজোলিউশনের কারণে রিয়েল-পিসিআর খুব সামান্য পরিবর্তন সনাক্ত করতে পারে।

• প্রচলিত PCR এর শেষ বিন্দু সনাক্তকরণের মধ্যে সামান্য গতিশীল পরিসর আছে যখন রিয়েল-টাইম পিসিআর সনাক্তকরণের ব্যাপক ডায়নামিক রেঞ্জ রয়েছে।

• প্রচলিত PCRের মত, স্বয়ংক্রিয় সনাক্তকরণ কৌশলগুলি রিয়েল-টাইম PCR- তে পাওয়া যায়।

• প্রচলিত পিসিআর অত্যন্ত বাস্তবিক এবং বাস্তব সময় পিসিআরের তুলনায় শ্রম নিবিড়।

• রিয়েল টাইম পিসিআর থেকে ভিন্ন, প্রচলিত পিসিআর মৃত ও জীবিত ব্যাকটেরিয়াগুলির মধ্যে বৈষম্য করতে পারে না।

• রিয়েল-টাইম পিসিআর পণ্যগুলি সনাক্ত করার জন্য ফ্লোরসেন্ট ছোপানো সিস্টেম ব্যবহার করে যখন প্রচলিত PCR এডিওডিয়াম ব্রোমাইড এবং ইউভি লাইট ব্যবহার করে agarose gel মাঝারি ব্যান্ডগুলি দৃশ্যমান করে।