জিন ক্লোনিং এবং পিসিআর মধ্যে পার্থক্য | জিএন ক্লোনিং বি পিসিআর

Anonim

কী পার্থক্য - পিনের সাথে জিন ক্লোনিংয়ের

ডিএনএ'র অনেক ডিএনএ সংশ্লেষণের একটি ডিএনএ সংশ্লেষণকে ডিএনএ সংশ্লেষণ বলা হয়। জিন ক্লোনিং এবং PCR- এর দুটি প্রধান ডিএনএ প্রসারণীয় প্রক্রিয়া রয়েছে। জিন ক্লোনিং এবং পিসিআর মধ্যে কী পার্থক্য হল, জিন ক্লোনিং একটি নির্দিষ্ট জিনের একাধিক অনুলিপি তৈরি করে ভিভোতে একটি পুনরায় সমন্বয়কারী ডিএনএ তৈরি করে এবং একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়ামের ভিতরে বৃদ্ধি করে যখন PCR এর লক্ষ লক্ষ কপি তৈরী করে নির্দিষ্ট ডিএনএ টুকরা ইন vitro বিকৃতি এবং সংশ্লেষণের পুনরাবৃত্ত চক্রের মধ্য দিয়ে চলছে।

সুচিপত্র

1। সংক্ষিপ্ত বিবরণ এবং কী পার্থক্য

2 জিন ক্লোনিং কি

3 PCR কি

4 সাইড তুলনা দ্বারা সাইড - জিপি ক্লোনিং vs PCR

5 সারসংক্ষেপ

জিন ক্লোনিং কি?

জিন ক্লোনিং হল একটি কৌশল যা রেকার্বনাব্যান ডিএনএ নির্মাণের মাধ্যমে একটি জীবের ডিএনএ এক্সট্রেটেড জেনোমিক ডিএনএ সনাক্ত করার জন্য নির্দিষ্ট জিনকে সনাক্ত করে এবং গুণিত করে। প্রোটিন জন্য এনকোডেড জেনোমিক ডিএনএ হাজার হাজার বিভিন্ন জিন। ডিএনএ নিষ্কাশিত হয়, এটি সহ্য করতে পারে যে সব সম্ভাব্য জিন অন্তর্ভুক্ত। জিন ক্লোনিং টেকনিক সম্পূর্ণ ডিএনএ থেকে একটি নির্দিষ্ট জিন সনাক্তকরণ সক্ষম করেছে। তাই জিন ক্লোনিং আণবিক জীববিদ্যা একটি গুরুত্বপূর্ণ হাতিয়ার হিসাবে কাজ করে।

--২ ->

ডিএনএতে প্রাসঙ্গিক জিনের অবস্থান সম্পর্কে কোন চিহ্ন নেই তবে জিন ক্লোনিংয়ের জন্য একটি জীবের জিনোমিক লাইব্রেরি তৈরি করা অপরিহার্য। একটি জিনোমিক লাইব্রেরি নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলি ব্যবহার করে তৈরি করা হয়।

ধাপ 1: একটি জীব থেকে ডিএনএর এক্সট্রাকশন যা প্রাণবন্ত জিন ধারণ করে।

ধাপ 2: এক্সট্রেটেড ডিএনএর নিষ্ক্রিয়তা হ্রাস ক্ষুদ্র ব্যবস্থাপক টুকরা উত্পাদন। এই পদক্ষেপ সীমাবদ্ধতা endonucleases দ্বারা সাহায্য করা হয়।

ধাপ 3: একটি যথাযথ ভেক্টর নির্বাচন এবং একই সীমাবদ্ধতার শেষকোণটি ব্যবহার করে ভেক্টর ডিএনএ খোলার জন্য। ব্যাকটেরিয়াল প্লাসমিড সাধারণত বিদেশী ডিএনএ বহন করার জন্য ভেক্টর হিসাবে ব্যবহৃত হয়। প্লাজমিডগুলি ব্যাকটেরিয়ার মধ্যে অবস্থিত ডিএনএর ছোট বৃত্ত।

ধাপ 4: ভেক্টর ডিএনএ এবং ডিএনএ পুনর্গঠন করে ডিএনএ পুনর্গঠনকারী ডিএনএ উৎপন্ন করে। এই ধাপ ডিএনএ ল্যাগেস দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়।

ধাপ 5: হোস্ট ব্যাকটেরিয়াতে ডিএনএ অণুর পুনরায় কোকব্যান্যান্ট হস্তান্তর করা। এই ধাপ রূপান্তর রূপে পরিচিত, এবং একটি তাপ শক ব্যবহার করা হয়।

ধাপ 5: একটি সংস্কৃতি মাধ্যমের রূপান্তরিত ব্যাকটেরিয়াল কোষের স্ক্রীনিং। রূপান্তরিত এবং nontransformed হোস্ট কোষ একটি মিশ্র জনসংখ্যা রূপান্তর প্রক্রিয়া শেষে প্রাপ্ত হয়। হিসাবে সুদ জিন শুধুমাত্র রূপান্তরিত হোস্ট কোষ অন্তর্ভুক্ত।অতএব, রূপান্তরিত কোষ নির্বাচন করা প্রয়োজন। নির্বাচনটি নির্বাচনী মিডিয়া ব্যবহার করে তৈরি করা হয় যা এন্টিবায়োটিকগুলি ধারণ করে। শুধুমাত্র পরিবর্তিত কোষগুলি এই স্ক্রীনিং মাধ্যমের মাধ্যমে নির্বাচনকে সক্ষম করে।

ধাপ 6: ব্যাকটেরিয়া বাড়ানোর জন্য একটি জিন লাইব্রেরি তৈরি। এই ধাপে, রূপান্তরিত হোস্ট কোষগুলি তাজা সংস্কৃতি মিডিয়াতে চালু করা হয় যা সর্বোত্তম বৃদ্ধি প্রয়োজনীয়তা প্রদান করে। সংস্কৃতি প্লেটের মোট উপনিবেশগুলি সেই জীবের জিনোমিক লাইব্রেরিটি উপস্থাপন করে।

ধাপ 7: রিঙ্কোম্যান্যান্ট ডিএনএ অণুতে সুষম জিন ধারণকারী রেঙ্কবিনিন ডিএনএ'র হাজারো ক্লোন টুকরা থেকে পরীক্ষা করা উচিত। এটি জিনের নির্দিষ্ট জিন বা নির্দিষ্ট প্রোটিন ফলাফল চিহ্নিত করে প্রোবের ব্যবহার দ্বারা সম্পন্ন করা যায়।

একবার যখন জীবাণু উপনিবেশ ধারণকারী আগ্রহী জিনটি মোট উপনিবেশ থেকে সনাক্ত করা হয়, তখন জিনটি ধারণ করে পুনরায় কোঙ্কবিন্যান্ট প্লাজমডের লক্ষাধিক কপি তৈরি করা সম্ভব।

জিন লাইব্রেরি স্থাপন করা, বিশেষ প্রোটিন, ভিটামিন, অ্যান্টিবায়োটিক, হরমোন, সিকোয়েন্সিং এবং জীবজগৎকে ম্যাপিং জিনোম তৈরির কাজে ব্যবহার করা হয়, যার ফলে ফরেনসিকের বিভিন্ন ডিএনএতে একাধিক অনুলিপি তৈরি করা হয়।

চিত্র_1: জিন ক্লোনিং

পিসিআর কি?

পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর) একটি টেকনিক যা একটি বিশেষ ডিএনএ টুকরা একটি বড় সংখ্যা কপি তৈরি। একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ অনুক্রমের এক্সপ্যান্যানাল এক্সপ্লিফিকেশন পিসিআর দ্বারা ইন vitro অবস্থার অধীনে প্রাপ্ত হয়। এই কৌশলটি আণবিক জীববিজ্ঞানে একটি অত্যন্ত শক্তিশালী হাতিয়ার কারণ এটি একটি ব্যবহারযোগ্য পরিমাণে ডিএনএর একটি ছোট নমুনাকে গুণ করতে পারে। পিসিআরটি 1983 সালে কার মুলিস দ্বারা চালু হয় এবং এই পুরস্কার-বিজয়ী আবিষ্কারটি আণবিক জীববিজ্ঞানে একটি বিশাল অগ্রগতি সৃষ্টি করে।

পিসিআর টেকনোলজি পিসিআর প্রতিক্রিয়া অনুসরণ করে যেমন চিত্র ২২ তে দেখানো হয়েছে। এক পিসিআর প্রতিক্রিয়া তিনটি ভিন্ন ধাপে তিনটি প্রধান পদক্ষেপ নিয়ে গঠিত; ডিএনএতে 94 0 সি, প্রাইমারে 68 * 999 এ 0 সি এবং 7২ 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 99 অতএব, যখন PCR সঞ্চালিত হয়, সঠিক প্রতিলিপি জন্য তাপমাত্রা উষ্ণতা অত্যন্ত রক্ষণাবেক্ষণ করা উচিত। PCR PCR টিউবগুলির ভিতরে একটি PCR মেশিনে সঞ্চালিত হয়। পিসিআর টিউবগুলি টেমপ্লেট ডিএনএ, তাক পলিমারেজ, প্রাইমার, ড্যান্টিপি এবং বাফার সহ সঠিক পিসিআর মিশ্রণের সাথে লোড করা হয়। দ্বিগুণ ফাঁকা নমুনা ডিএনএকে একক ফাঁকা ডিএনএর সংমিশ্রণে সম্পূরক ঘাঁটিগুলির মধ্যে 94-98 0 সি এ হাইড্রোজেন বন্ধনগুলি ভেঙ্গে যায়। তারপর টেমপ্লেট ডিএনএ একক strands primers জন্য উন্মুক্ত করা হয়। প্রাইমারের একটি জোড়া (ফরোয়ার্ড এবং বিপরীত) প্রদান করা উচিত, এবং তারা উচ্চ তাপমাত্রা সহ্য সহ্য করতে হবে। প্রাথমিক ডিএনএ টুকরা সমাপ্তির জন্য সম্পূরক একটি অবিচ্ছিন্ন ছোট ডিএনএ সংকলন। সিন্থেটিক প্রাইমারে PCR ব্যবহার করা হয়। Primers নমুনা ডিএনএ এর পরিপূরক ঘাঁটি সঙ্গে বাঁধন এবং একটি নতুন উপকূলের সংশ্লেষণ শুরু। এই পদক্ষেপটি টাক পলিমারেজ নামে একটি এনজাইম দ্বারা অনুঘটক; থার্মাস আউকাতিকাস থেকে বিচ্ছিন্ন একটি তাপীয় ডিএনএ পলিমেরেজ এনজাইম। যখন প্রাথমিক এবং নিউক্লিওটাইড (বিল্ডিং ব্লক) পাওয়া যায়, তখন টাক পলিমারেজ নতুন ডিএনএ টেমপ্লেট ডিএনএ টেমপ্লেট তৈরি করে।পিসিআর কর্মসূচির শেষে, জেল ইলেক্ট্রোফোরিয়সিসের মাধ্যমে ডিএনএ ছড়িয়ে পড়ে। আরও বিশ্লেষণের প্রয়োজন হলে, পিসিআর পণ্য জেল থেকে শুদ্ধ করা হয়। জেনারেটর এবং অর্জিত রোগ নির্ণয় ও নিরীক্ষণ, অপরাধীদের চিহ্নিতকরণ (ফরেনসিক ক্ষেত্রের ক্ষেত্রে), ডিএনএ'র একটি লক্ষ্যবস্তু সেক্টরের গঠন এবং ফাংশন অধ্যয়ন, সিকোয়েন্সিং এবং জীবের জিনোমের ম্যাপিং ইত্যাদির জন্য পিসিআর খুবই উপযোগী। পিসিআর বিজ্ঞানীদের মধ্যে চিকিৎসা এবং আণবিক জীববিদ্যা গবেষণা ল্যাবরেটরি একটি রুটিন ল্যাবরেটরি কৌশল হয়ে উঠেছে কারণ এটি বিভিন্ন ধরনের অ্যাপ্লিকেশন রয়েছে। চিত্র_2: পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন জিন ক্লোনিং এবং পিসিআর মধ্যে পার্থক্য কি?

- টেবিল থেকে ডিফ্রএফ আর্টিকেল মধ্যম ->

পিসিআর বনাম জিন ক্লোনিং

জিন ক্লোনিংটি একটি নির্দিষ্ট জিনের একাধিক অনুলিপি তৈরি করার প্রক্রিয়া।

ভিভোতে

রিমিকম্ব্যান ডিএনএর মাধ্যমে এবং একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়া ।

পুনরায় কোকব্যান্যান্ট ডিএনএ নির্মাণের প্রয়োজন জিন সনাক্তকরণের জন্য পুনরায় কোমবিন্যান্ট ডিএনএ তৈরি করা হয়। পুনরায় কম্পোনেন্ট ডিএনএ উৎপাদিত হয় না। শ্রমের প্রয়োজন এই প্রক্রিয়া শ্রম নিবিড়। নিবিড় শ্রম প্রয়োজন হয় না।
ভিভোতে বা ইন ভিট্রো প্রক্রিয়াতে
ভিট্রো এবং ডিএনএর বিস্তার
ভিভো
তে ভিট্রো
এর মধ্যে।
ডিএনএর বিস্তার সম্পূর্ণভাবে ইন vitro। সংক্ষিপ্ত বিবরণ - জিএন ক্লোনিং পিসিআর জিন ক্লোনিং এবং পিসিআর দুটি উপায়ে ডিএনএ বিস্তারের জন্য ব্যবহৃত হয়। PCR হল একটি ইন ভিট্রো পদ্ধতি যা পুনরায় ডিজিটাল ডিএনএ এবং একটি হোস্ট জীব ব্যবহার না করে একটি নির্দিষ্ট ডিএনএ টুকরা ডিএনএর একাধিক অনুলিপি তৈরি করে। জিন ক্লোনিং প্রাথমিকভাবে একটি ভিভো

প্রক্রিয়া যা রেকমাম্যান্যান্ট ডিএনএ নির্মাণের মাধ্যমে হোস্টের জীবের ভিতরে একটি আগ্রহী জিনের একাধিক অনুলিপি তৈরি করে। এই জিন ক্লোনিং এবং পিসিআর মধ্যে পার্থক্য।

রেফারেন্স: 1 গ্রিফিথস, এন্থনি জেএফ "একটি নির্দিষ্ট জিন ক্লোনিং। "আধুনিক জেনেটিক বিশ্লেষণ ইউ.এস. ন্যাশনাল লাইব্রেরী মেডিসিন, 01 জানুয়ারি 1999. ওয়েব। ২২ ফেব্রুয়ারি 2017 ২ "পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর)। "ন্যাশনাল সেন্টার ফর বায়োটেকনোলজি ইনফরমেশন" ইউ.এস. ন্যাশনাল লাইব্রেরী অফ মেডিসিন, এন। ঘ। ওয়েব। 22 ফেব্রুয়ারি 2017 চিত্র সৌজন্যে: 1 "চিত্র 17 01 06" সিএনএক্স ওপেন স্ট্যাক্সের মাধ্যমে - (সিসি বাই 4 0) কমিকস এর মাধ্যমে উইকিমিডিয়া

২। "পিসিআর" মাদপ্রোমী দ্বারা - নিজস্ব কাজ (সিসি বাই-এসএ 3. 0) কমন্স দ্বারা উইকিমিডিয়া